全自動立體定位儀是神經解剖學、神經生理學、神經藥理學和神經外科的重要研究儀器。全自動腦立體定位儀已廣泛應用于腦損傷、神經刺激和腦電圖記錄的準確定位,已成為研究大腦結構和功能的必要工具。
全自動立體定位儀的操作方法:
1、動物麻醉:小鼠,體重20-30g,稱重后以0.4%C11H17O3N2Na麻醉注射,注射時必須緩慢,隨時注意動物狀態(tài)。
2、小鼠頭部固定:將小鼠的門齒固定于全自動腦立體定位儀上頜固定器,然后把一側的耳捧推入動物的外道后,使動物的頭在處于兩滑道正中。再將另一耳捧推入另一側的外耳道。這時觀察兩個耳棒的刻度一致后,將兩耳棒上的固定螺絲扭緊,在將牙齒固定器上壓鼻環(huán)壓下后扭緊(鼻環(huán)、耳棒的松緊度調節(jié)適宜為好),這時從各個方向推壓動物頭部均不會出現移動。
3、開顱鉆孔前的備皮:剪去動物頭部毛,用2%碘酒及75%酒精棉球作頭部皮膚的消毒,沿矢狀縫作-3cm長的皮膚切口,分離皮下組織,用雙氧水清潔顱骨表面的筋膜及肌肉并剝離,推開骨膜,暴露前囟、人字縫及矢狀縫。
4、確定標準中線:將金屬定位針向下移動到矢狀縫上方后,再前后移動定位針,使定位針定位到前囟。
5、小鼠定位:用定位針在前囟后2mm,矢狀縫旁開2.5mm處定位一點,即為小鼠的平面位置,然后在此點上用鉆孔針在顱骨上鉆一小圓孔。
6、注射藥物:小鼠位于該圓孔下2mm,將1ml注射器吸入藥物安置到微操作儀上,操作儀器使注射器針頭由小鼠腦鉆孔處下降2mm時完成藥物注射到小鼠腦海馬處。
7、制作腦組織切片:將小鼠腦制作成切片,顯微觀察小鼠腦中紅染料位置來驗證小鼠腦海馬中是否定位準確。